Mitogenna odpowiedź psich komórek nabłonka podstawnego w hodowli krótkoterminowej na transformujący czynnik wzrostu alfa i insulinopodobny czynnik wzrostu I.

Przedstawiono metody umożliwiające hodowlę szybko dzielących się komórek nabłonka żołądka w celu zbadania regulacji replikacji komórek śluzówki. Komórki z psiej błony śluzowej zostały zdyspergowane przez traktowanie enzymem, wzbogacone przez filtrację i elutriację i hodowane na żelu kolagenowym w pożywce DMEM / F12. Po 48 godzinach więcej niż 95% komórek wykazywało immunoreaktywność z przeciwciałem wobec cytokeratyny, markera nabłonka. Komórki utworzyły konfluentne monowarstwy w ciągu 72 godzin z oporem transbłonowym wynoszącym 1600 ohm.cm2 po zamontowaniu w komorze Ussinga, co wskazuje na zachowanie charakterystyki komórek nabłonka. Surowica cielęca (0,1-2%) dawała zależne od dawki działanie mitogenne, widoczne dzięki zwiększeniu włączenia [3H] -tymidyny do materiału wytrąconego kwasem i liczby komórek. Po 18-24-godzinnej inkubacji z [3H] -tymidyną około 55% komórek hodowanych w 2% surowicy wykazywało dowody na syntezę DNA przez autoradiografię i wszystkie komórki replikujące były pozytywne pod względem cytokeratyny. Stosując porównywalne warunki hodowli, podobny odsetek komórek inkubowanych przez 18-24 godziny z bromodeoksyurydyną wykazywał immunoreaktywność jądrowego anty-bromodeoksyurydyny, co wskazuje, że ponad połowa komórek w tych hodowlach syntetyzowała DNA podczas tego okresu. Podobnie jak w przypadku surowicy, naskórkowego czynnika wzrostu i transformującego czynnika wzrostu alfa (TGF alfa) (10 pM do nM), insulina (10 nM do mikroM) i insulinopodobny czynnik wzrostu I (IGF-I, 1-100 nM) wzrosła [ Pobór 3H] -tymidyny. Większa siła działania IGF-I w porównaniu z insuliną sugeruje obecność receptorów IGF-I. Wnioskujemy, że ten preparat hodowli składa się z komórek nabłonka błony śluzowej i zawiera przewagę dzielących się komórek nabłonka. EGF / TGF alfa i IGF-I są potencjalnymi czynnikami bezpośrednio regulującymi proliferację komórek błony śluzowej dna.
[podobne: sachol opinie, oksyhemoglobina, vicebrol cena ]