Natychmiastowe wczesne indukowanie genów i aktywacja kinazy MAP podczas odzyskiwania z metabolicznego hamowania w hodowanych miocytach sercowych.

Aby zbadać, w jaki sposób miocyty sercowe powracają do zdrowia po krótkim okresie niedokrwienia, zastosowaliśmy model hamowania metabolicznego (MI), jeden z modeli niedokrwiennych in vitro, miocytów kurczęcych zarodkowych komorowych oraz zbadano indukcję mRNA genów o natychmiastowym wczesnym (IE) i aktywność kinazy białkowej aktywowanej mitogenem (MAP). Przeprowadziliśmy analizę Northern blot, aby zbadać ekspresję mRNA c-jun, c-fos i c-myc podczas MI za pomocą mM NaCN i 20 mM 2-deoksy-d-glukozy, a także podczas odzyskiwania z MI 30 min. . MRNA c-fos indukowano przejściowo w czasie 30 i 60 minut podczas odzyskiwania. Ekspresja mRNA c-jun była istotnie zwiększona w 30, 60, 90 i 120 min podczas odzyskiwania (odpowiednio 3,0-, 4,7-, 2,4- i 1,9-krotna indukcja), podobnie jak ekspresja c-myc mRNA (indukcja odpowiednio 1,4-, 1,7-, 1,8- i 2,0-krotna). Przeciwnie, poziomy tych mRNA pozostały niezmienione podczas MI. Test przesunięcia ruchliwości elektroforetycznej ujawnił, że aktywność wiązania AP-1 DNA znacząco wzrosła po 120 minutach podczas odzyskiwania. Gdy komórki były wcześniej traktowane inhibitorami kinazy białkowej C (PKC), 100 mikroM H-7 lub mikroM staurosporyną, indukcja mRNA c-jun po 60 min podczas odzyskiwania była znacznie tłumiona (odpowiednio, 95 lub 82% redukcja). Indukcja c-jun była częściowo hamowana, gdy komórki traktowano 2 mM EGTA podczas MI i odzysku (42% redukcji). Aktywność kinazy MAP oznaczona ilościowo za pomocą oznaczenia kinazy w żelu była niezmieniona podczas MI, ale znacznie wzrosła po 5, 10 i 15 min podczas odzyskiwania (odpowiednio 3,0-, 4,1- i 3,4-krotny wzrost). Aktywność kinazy S6 również zwiększono znacząco po 15 minutach podczas odzyskiwania. Tak więc, te dane sugerują, że geny IE, jak również kinaza MAP, mogą odgrywać rolę w procesie odzyskiwania miocytów sercowych z MI i że zwiększenie ekspresji c-jun wymaga aktywacji PKC i do pewnego stopnia [Ca2 +]. Obrazy
[przypisy: hydrocortisonum cena, flucofast opinie, oksydaza ksantynowa ]