Prolimery granulokocytów-makrofagów jako kandydaci na komórki białaczkowe w chorobie Blast-Crisis CML cd

Obrazy konfokalne uzyskano przy użyciu konfokalnego mikroskopu fluorescencyjnego o podwójnej fotonie (model LSM510, Zeiss) przy powiększeniu 100x, a obrazy trójwymiarowe wykonano za pomocą oprogramowania Volocity (opisane w Metodzie 3 Dodatkowego Dodatku ). Test Reportera LEF / TCF
Lentiwirusowy reporter LEF / TCF (Figura Dodatkowego Dodatku) został użyty do oceny zdolności .-kateniny do aktywacji transkrypcji za pomocą LEF / TCF w posortowanych populacjach normalnych i hematopoetycznych komórek macierzystych CML i mieloidalnych komórek progenitorowych, zasadniczo jak poprzednio. opisano, z substytucją ludzkich cytokin interleukina-6 (10 ng na mililitr), ligand Flt3 (50 ng na mililitr), współczynnik stali (50 ng na mililitr) i trombopoetynę (10 ng na mililitr) .7,57
Wyniki
Hematopoietic Stem Cells and Progenitor Cells in CML
Ryc. 1. Ryc. 1. Średnie (+ SE) Proporcje komórek macierzystych CD90 + hematopoetycznych (panel A) i populacje genów szpikowych (panel B) oraz poziomy transkryptów BCR-ABL (panel C). Panel A pokazuje odsetek hematopoetycznych komórek macierzystych (HSC) w obrębie populacji komórek CD34 + CD38Lin w szpiku kostnym (BM) od 11 osób kontrolnych, 5 pacjentów z CML w fazie przewlekłej (CP), 6 pacjentów z CML w fazie przyspieszonej ( AP), 4 pacjentów z CML w przełomie blastycznym (BC), 6 pacjentów po leczeniu imatynibem i 4 pacjentów z CML oporną na imatynib. Panel B pokazuje procent indywidualnych populacji komórek progenitorowych szpikowych, w tym wspólnych progenitorów szpikowych (CMP), progenitorów granulocytów i makrofagów (GMP) oraz progenitorów erytroidalnych megakariocytów (MEP), wyrażonych jako procent frakcji Lin CD34 + CD38 + te same próbki. Analizy statystyczne przeprowadzono za pomocą oprogramowania Excel i dwustronnego testu t-Studenta z niezależnym testem. Panel C pokazuje średnią liczbę transkryptów BCR-ABL na nanogram RNA pochodzącego z K562 (linia komórkowa z chromosomem Philadelphia) lub szpik kostny z 5 kontroli, 14 pacjentów z CML (w fazie przewlekłej, fazie przyspieszonej lub przełomie blastycznym) przed rozpoczęciem leczenia imatynibem, 4 pacjentów po leczeniu imatynibem i 6 pacjentów z CML opornym na imatynib, a także z krwiotwórczych komórek macierzystych, wspólnych progenitorów szpikowych, progenitorów granulocytów i makrofagów oraz progenitorów erytroidalnych megakariocytów.
Analiza FACS ujawniła wyższe poziomy puli progenitorowej (komórki CD34 + Lin) w szpiku kostnym od pacjentów z CML w fazie przyspieszonej lub blastycznej niż w normalnym szpiku kostnym (Figura 1A w Dodatku Uzupełniającym). W obrębie puli progenitorowej populacja hematopoetycznych komórek macierzystych (CD34 + CD38CD90 + Lin) nie rozszerzyła się istotnie wraz z postępem choroby (Figura 1A). Jednak ocena pojedynczych populacji komórek szpikowych (CD34 + CD38 + Lin) wykazała, że w porównaniu z prawidłowym szpikiem kostnym zwiększona liczba progenitorów erytrocytów megakariocytów była obecna w szpiku od pacjentów z CML w fazie przewlekłej (P <0,001), poziomy wspólnych szpikowych komórek progenitorowych były zwiększone u pacjentów z CML w fazie akceleracji (P = 0,004), a poziomy progenitorów granulocytów i makrofagów były zwiększone w szpiku od pacjentów z CML w przełomie blastycznym (P = 0,02) (Figura 1B) [podobne: ceftriakson, nutrend, dienogest ] [podobne: flucofast opinie, goodlookin allegro, hydrocortisonum cena ]