Utrata Smad3 w ostrej białaczce limfoblastycznej z limfocytów T ad 6

Jeśli chodzi o interleukinę-2, podstawowa produkcja w hodowanych komórkach T od myszy Smad3 – / – była dwukrotnie większa niż w hodowlach komórek T od myszy Smad3 + / +, z wartością pośrednią w hodowlach komórek T od myszy Smad3 +/- (Figura 2C) . Hodowanie komórek T z myszy Smad3 + / + za pomocą TGF-. przy IC50 przedstawionym na Figurze 2B zmniejszało poziom interleukiny-2 o czynnik 74, w porównaniu z czynnikiem 7,4 dla komórek T z myszy Smad3 +/- i 3 dla Komórki T od myszy Smad3 – / -. Smad3 i p27Kip1 w supresji Leukemogenezy
Figura 3. Figura 3. Continue reading „Utrata Smad3 w ostrej białaczce limfoblastycznej z limfocytów T ad 6”

Wzorce ekspresji genów w opornych na leki komórkach ostrej białaczki limfoblastycznej i odpowiedź na leczenie ad 6

Podobnie analizy głównych składowych prawidłowo grupowały próbki od większości pacjentów do odpornego lub wrażliwego klastra dla każdego z czterech czynników przeciwbiałaczkowych (ryc. 2). Hierarchiczne grupowanie i analizy głównych składników obejmujące wszystkich 173 pacjentów dały podobne wyniki (ryc. 3 i 4 w dodatkowym dodatku). Identyfikacja zestawu sond, nazwy genów, adnotacje i stosunek ekspresji genu w opornych na wrażliwe komórki białaczki dla genów różnicujących pokazano dla każdego leku na Figurach 5, 6, 7 i 8 (linia B ALL) i 9, 10, 11 i 12 (linia B i kombinacja T-cell w połączeniu) w dodatkowym dodatku. Continue reading „Wzorce ekspresji genów w opornych na leki komórkach ostrej białaczki limfoblastycznej i odpowiedź na leczenie ad 6”

Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 12

Ponieważ sekwencja konsensusowa ma większe powinowactwo do izoformy ., założono, że ta izoforma hamuje wiązanie izoformy .33, ale nie ustalono związku między nadekspresją izoformy . a diagnozą astmy.34 badania, glukokortykoidy aktywowały receptor glukokortykoidowy we wszystkich liniach komórek mięśni gładkich oskrzeli, niezależnie od stanu chorobowego, i nie zaobserwowaliśmy silniejszego sygnału dla izoformy . w komórkach mięśni gładkich oskrzeli od osób z astmą niż u osób bez astmy . Ponadto, nie wykryliśmy podwójnego prążka dla receptora w cytozolowych frakcjach białkowych, podczas gdy drugie pasmo białka, które reagowało z przeciwciałem przeciw receptorowi glukokortykoidowemu stało się widoczne tylko we frakcjach białka jądrowego tuż po traktowaniu glukokortykoidem. Aktywacja receptora glukokortykoidowego przez różne glukokortykoidy hamowała stymulowane surowicą wydzielanie interleukiny-6 we wszystkich liniach komórek mięśni gładkich oskrzeli, a mifepriston odwracał ten efekt. Continue reading „Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 12”

Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 5

Swoistość obserwowanych kompleksów DNA-białko charakteryzowała się wstępną inkubacją ekstraktów z 10-krotną normalną ilością konkurencyjnego, nieznakowanego elementu reagującego na glukokortykoidy lub oligonukleotydami CCAAT.25,26,28. Koimmunoprecypitacja receptora glukokortykoidowego lub C / EBP-.
Koimmunoprecypitacje przeprowadzono w sposób opisany uprzednio.25 Ekstrakty białka jądrowego (20 .l) inkubowano przez noc w 4 ° C z przeciwciałem przeciw C / EBP. (1 .g na mililitr) lub przeciw receptorowi glukokortykoidowemu (1 .g na mililitr, Santa Cruz), a następnie inkubowano przez godzinę z białkiem A Sepharose (1 mg na mililitr) w soli fizjologicznej buforowanej fosforanem w 37 ° C. Po odwirowaniu przy 5000 xg przez pięć minut, osad przemyto dwukrotnie 2 ml soli fizjologicznej buforowanej fosforanem, a następnie ponownie zawieszono w buforze Laemmli i analizowano za pomocą immunoblottingu. Continue reading „Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 5”

Zespół Sjögrena-Larssona. Upośledzenie utleniania alkoholu tłuszczowego w hodowanych fibroblastach z powodu niedoboru alkoholu tłuszczowego: aktywność oksydoreduktazy dinukleotydu nikotynamidoadeninowego.

Metabolizm lipidów badano w hodowlach fibroblastów skóry od pacjentów z wrodzonym zaburzeniem, zespołem Sjögrena-Larssona (SLS). Nienaruszone fibroblasty SLS inkubowane w obecności palmitynianu [1-14C] gromadziły więcej radioaktywnego heksadekanolu niż normalne komórki, podczas gdy włączanie radioaktywności do innych lipidów komórkowych pozostawało niezmienione. Zawartość heksadekanolu w fibroblastach SLS była nienormalnie podwyższona. Kumulacja heksadekanolu nie była spowodowana zwiększoną syntezą alkoholu tłuszczowego ani jego niedostatecznym wykorzystaniem do syntezy eteru glicerolu. Okres półtrwania wewnątrzkomórkowego heksadekanolu wprowadzonego do fibroblastów SLS był zwiększony (70 min) w porównaniu z prawidłowym (15 min), a nienaruszone fibroblasty SLS wykazywały upośledzone utlenianie [14C] -heksadekanolu do kwasu tłuszczowego. Continue reading „Zespół Sjögrena-Larssona. Upośledzenie utleniania alkoholu tłuszczowego w hodowanych fibroblastach z powodu niedoboru alkoholu tłuszczowego: aktywność oksydoreduktazy dinukleotydu nikotynamidoadeninowego.”

Uwalnianie nadtlenku wodoru przez makrofagi pęcherzykowe z pacjentów sarkoidalnych i makrofagi pęcherzykowe normalnych po ekspozycji na rekombinowane interferony alfa A, beta i gamma oraz 1,25-dihydroksywitamina D3.

Mierzono uwalnianie H2O2 przez ludzkie pęcherzykowe makrofagi (AM) od normalnych i pacjentów sarkoidalnych w zawiesinie natychmiast po płukaniu oskrzelowo-pęcherzykowym w obecności i bez czynnika wyzwalającego, octan mirystynianu forbolu (PMA). AM od 11 pacjentów z sarkoidozą wytworzyło średnią (+/- SE) makrofagów 21,7 +/- 2,3 i 5,9 +/- 3,4 nmol H2O2 / 10 (6) odpowiednio w obecności i przy braku PMA. Przeciwnie, AM z normaliów (n = 6) powodowało odpowiednio 9,8 +/- 1,7 i 1,6 +/- 0,7 nmola H2O2 / 10 (6) makrofagów zi bez PMA. Aktywacja makrofagów, monitorowana przez wytwarzanie H2O2, nie korelowała z poziomami enzymu konwertującego angiotensynę, wynikiem skanów galu-67 lub procentem limfocytów w płukaniu oskrzelowo-pęcherzykowym. Aby określić, czy AM z normaliów można stymulować w celu zwiększenia produkcji H2O2 do poziomu obserwowanego u pacjentów z sarkoidozą, zmierzono H2O2 uwolniony przez adherentną AM po inkubacji w każdym z czterech potencjalnych czynników aktywujących: rekombinowane interferony alfa A, beta, gamma (rIFN alfa A, rIFN beta i rIFN gamma, odpowiednio) i 1,25-dihydroksywitamina D3. Continue reading „Uwalnianie nadtlenku wodoru przez makrofagi pęcherzykowe z pacjentów sarkoidalnych i makrofagi pęcherzykowe normalnych po ekspozycji na rekombinowane interferony alfa A, beta i gamma oraz 1,25-dihydroksywitamina D3.”

Wydzielanie wodorowęglanu i absorpcja chlorków przez korowe kolektory zbiorcze. Rola wymiany chlorków / wodorowęglanów.

Korowe kanały zbierające (CCD) królików traktowanych deoxycorticosterone (DOC) aktywnie wydzielają wodorowęglan z dużą szybkością. Aby zbadać mechanizm wydzielania dwuwęglanów, zmierzono transport wodorowęglanów i chlorków w CCD od królików traktowanych DOC przez 9-24 dni. Usunięcie chlorku (zastąpionego glukonianem) z perfuzatu i kąpieli hamowało wydzielanie dwuwęglanów bez zmiany napięcia przeznabłonkowego. Usunięcie chlorku tylko z kąpieli zwiększyło wydzielanie wodorowęglanu, podczas gdy usuwanie chlorku tylko z wydzielania hamowanego przez perfuzat. W przeciwieństwie do efektu usuwania chlorku, usunięcie sodu zarówno z perfuzatu, jak i kąpieli (zastąpienie N-metylo-D-glukaminą) nie zmieniło szybkości wydzielania dwuwęglanu. Continue reading „Wydzielanie wodorowęglanu i absorpcja chlorków przez korowe kolektory zbiorcze. Rola wymiany chlorków / wodorowęglanów.”

Hamowanie syntezy glutationu zwiększa lizę mysich komórek nowotworowych przez antyneoplastyki reagujące na sulfhydryl.

GSH odgrywa ważną rolę w obronie komórkowej przed różnorodnymi toksycznymi elektrofilami poprzez tworzenie koniugatów tioeterowych. Przebadaliśmy rolę GSH w mysiej obronie komórek nowotworowych przed nową klasą antyneoplastów reagujących na sulfhydryl, laktonów seskwiterpenowych (SL). Inkubacja komórek mastocytów P815 z którymkolwiek z czterech testowanych SL (vernolepin, helenalina, słoniopina i eriofertopina) przez godzinę spowodowała 70-97% zubożenie GSH. Znaczenie resyntezy GSH po ekspozycji komórek nowotworowych na SL oceniano za pomocą butioniny sulfoksyiminy (BSO), selektywnego, nietoksycznego inhibitora syntetazy gamma-glutamylocysteiny. Zahamowanie syntezy GSH za pomocą 0,2 mM BSO wyraźnie wzmocniło cytolizę SL czterech mysich linii komórek nowotworowych. Continue reading „Hamowanie syntezy glutationu zwiększa lizę mysich komórek nowotworowych przez antyneoplastyki reagujące na sulfhydryl.”