Utrata Smad3 w ostrej białaczce limfoblastycznej z limfocytów T ad 6

Jeśli chodzi o interleukinę-2, podstawowa produkcja w hodowanych komórkach T od myszy Smad3 – / – była dwukrotnie większa niż w hodowlach komórek T od myszy Smad3 + / +, z wartością pośrednią w hodowlach komórek T od myszy Smad3 +/- (Figura 2C) . Hodowanie komórek T z myszy Smad3 + / + za pomocą TGF-. przy IC50 przedstawionym na Figurze 2B zmniejszało poziom interleukiny-2 o czynnik 74, w porównaniu z czynnikiem 7,4 dla komórek T z myszy Smad3 +/- i 3 dla Komórki T od myszy Smad3 – / -. Smad3 i p27Kip1 w supresji Leukemogenezy
Figura 3. Figura 3. Continue reading „Utrata Smad3 w ostrej białaczce limfoblastycznej z limfocytów T ad 6”

Wzorce ekspresji genów w opornych na leki komórkach ostrej białaczki limfoblastycznej i odpowiedź na leczenie ad 6

Podobnie analizy głównych składowych prawidłowo grupowały próbki od większości pacjentów do odpornego lub wrażliwego klastra dla każdego z czterech czynników przeciwbiałaczkowych (ryc. 2). Hierarchiczne grupowanie i analizy głównych składników obejmujące wszystkich 173 pacjentów dały podobne wyniki (ryc. 3 i 4 w dodatkowym dodatku). Identyfikacja zestawu sond, nazwy genów, adnotacje i stosunek ekspresji genu w opornych na wrażliwe komórki białaczki dla genów różnicujących pokazano dla każdego leku na Figurach 5, 6, 7 i 8 (linia B ALL) i 9, 10, 11 i 12 (linia B i kombinacja T-cell w połączeniu) w dodatkowym dodatku. Continue reading „Wzorce ekspresji genów w opornych na leki komórkach ostrej białaczki limfoblastycznej i odpowiedź na leczenie ad 6”

Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 12

Ponieważ sekwencja konsensusowa ma większe powinowactwo do izoformy ., założono, że ta izoforma hamuje wiązanie izoformy .33, ale nie ustalono związku między nadekspresją izoformy . a diagnozą astmy.34 badania, glukokortykoidy aktywowały receptor glukokortykoidowy we wszystkich liniach komórek mięśni gładkich oskrzeli, niezależnie od stanu chorobowego, i nie zaobserwowaliśmy silniejszego sygnału dla izoformy . w komórkach mięśni gładkich oskrzeli od osób z astmą niż u osób bez astmy . Ponadto, nie wykryliśmy podwójnego prążka dla receptora w cytozolowych frakcjach białkowych, podczas gdy drugie pasmo białka, które reagowało z przeciwciałem przeciw receptorowi glukokortykoidowemu stało się widoczne tylko we frakcjach białka jądrowego tuż po traktowaniu glukokortykoidem. Aktywacja receptora glukokortykoidowego przez różne glukokortykoidy hamowała stymulowane surowicą wydzielanie interleukiny-6 we wszystkich liniach komórek mięśni gładkich oskrzeli, a mifepriston odwracał ten efekt. Continue reading „Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 12”

Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 5

Swoistość obserwowanych kompleksów DNA-białko charakteryzowała się wstępną inkubacją ekstraktów z 10-krotną normalną ilością konkurencyjnego, nieznakowanego elementu reagującego na glukokortykoidy lub oligonukleotydami CCAAT.25,26,28. Koimmunoprecypitacja receptora glukokortykoidowego lub C / EBP-.
Koimmunoprecypitacje przeprowadzono w sposób opisany uprzednio.25 Ekstrakty białka jądrowego (20 .l) inkubowano przez noc w 4 ° C z przeciwciałem przeciw C / EBP. (1 .g na mililitr) lub przeciw receptorowi glukokortykoidowemu (1 .g na mililitr, Santa Cruz), a następnie inkubowano przez godzinę z białkiem A Sepharose (1 mg na mililitr) w soli fizjologicznej buforowanej fosforanem w 37 ° C. Po odwirowaniu przy 5000 xg przez pięć minut, osad przemyto dwukrotnie 2 ml soli fizjologicznej buforowanej fosforanem, a następnie ponownie zawieszono w buforze Laemmli i analizowano za pomocą immunoblottingu. Continue reading „Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 5”

Regulacja katabolizmu leucyny przez źródła kaloryczne. Rola glukozy i lipidów w oszczędzaniu azotu podczas deprywacji azotu.

Wcześniej wykazaliśmy, że hipokaloryczne ilości glukozy zmniejszają katabolizm leucyny, podczas gdy izokaloryczna ilość tłuszczu nie występuje (1985. J. Clin, Invest, 76: 737). Badanie to miało na celu zbadanie, czy ta sama różnica istnieje, gdy cała potrzeba kaloryczna jest dostarczana albo jako glukoza, albo lipid. Szczury utrzymywano przez 3 dni w całkowitym żywieniu pozajelitowym (350 kcal / kg na d), po czym zaprzestano wlewu aminokwasów i szczury otrzymywały taką samą ilość kalorii całkowicie jak glukoza lub lipid przez trzy kolejne dni. Continue reading „Regulacja katabolizmu leucyny przez źródła kaloryczne. Rola glukozy i lipidów w oszczędzaniu azotu podczas deprywacji azotu.”

Wpływ spożywanego tłuszczu, węglowodanów i białka na katabolizm aminokwasów rozgałęzionych podczas ograniczania kalorii.

Aby ocenić wpływ każdego kalorycznego źródła pokarmowego na katabolizm aminokwasów rozgałęzionych, zbadaliśmy tempo oksydacji leucyny przed i po otyłych ochotnikach spożyliśmy jedną z następujących diet na jeden tydzień: (a) głód, (b) 300 lub 500 cal tłuszczu / d, (c) 300 lub 500 cal węglowodanu / d, (d) 300 lub 500 cal białka / d, (e) mieszanina węglowodanów (300 cal / d) i tłuszczu (200 cali) / d) lub (f) mieszaniną węglowodanów (300 cal / d) i białka (200 cal / d). Głód istotnie zwiększał szybkość utleniania leucyny (1,4 +/- 0,11 vs. 1,8 +/- 0,16 mmol / h, P mniej niż 0,01). To samo miało miejsce w przypadku diet tłuszczowych i białkowych. W ostrym kontraście, 500-calowa dieta węglowodanowa znacznie zmniejszyła szybkość utleniania leucyny (1,3 +/- 0,13 vs. Continue reading „Wpływ spożywanego tłuszczu, węglowodanów i białka na katabolizm aminokwasów rozgałęzionych podczas ograniczania kalorii.”

Izolacja lipoprotein o wysokiej gęstości z komórek nabłonka jelitowego szczura.

Wcześniejsze badania określiły formy lipoprotein o dużej gęstości (HDL) w szczurzowej limfie krezkowej, sugerując, że mają one wydzielnicze pochodzenie. Badanie to opisuje izolację i charakterystykę wewnątrzkomórkowego HDL jelit. Wykonano dwa preparaty w następujący sposób: (a) wyizolowano enterocyty szczura i przygotowano frakcję organelli Golgiego. (b) Homogenaty komórkowe poddano kawitacji azotem i przygotowano frakcję cytoplazmatyczną. Lipoproteiny izolowano z obu preparatów przez sekwencyjne ultrawirowanie. Continue reading „Izolacja lipoprotein o wysokiej gęstości z komórek nabłonka jelitowego szczura.”

Synteza kłębuszkowa prostaglandyn i tromboksanu w nefrotoksycznym nerczycowym zapaleniu nerek u szczurów. Wpływ na hemodynamikę nerek.

Gromadzenie kłębuszkowego arachidonianu przez wyizolowany kłębuszek szczura oceniano in vitro w zapaleniu kłębuszków nerkowych wywołanym przeciwciałem przeciwpłytkowym (przeciw GBM) indukowanym przeciwciałami za pomocą testu radioimmunologicznego dla prostaglandyn (PG) i tromboksanu. Po pojedynczym dożylnym wstrzyknięciu króliczej surowicy anty-szczurzy GBM obserwowaliśmy wzmocnienie syntezy kłębuszkowej tromboksanu B2 (TxB2) już od 2 do 3 godzin z mniejszymi przyrostami w szybkościach alfa PGF2, PGE2 i 6-keto-PGF1 alfa. W dniu 2 choroby, synteza kłębuszkowa TxB2 i, w mniejszym stopniu, PGF2 alfa i PGE2 pozostała wzmocniona, podczas gdy w dniach 8, 11 i 14 TxB2 był jedynym prostanoidem syntetyzowanym ze zwiększoną szybkością. Synteza kłębuszkowa TxB2 korelowała z 24-godzinnym wydalaniem białka przed wycięciem. 60 minut po dożylnym wlewie surowicy anty-GMB, wskaźnik filtracji kłębuszkowej (GFR) zmniejszył się (0,66 +/- 0,04 do 0,44 +/- 0,03 ml / min na 100 g, P mniej niż 0,05), bez znaczącej zmiany w osoczu nerkowym przepływ (RPF): 1,97 +/- 0,23 do 1,80 +/- 0,23 ml / min na 100 g) i bez zmiany szybkości syntezy kłębuszków PG. Continue reading „Synteza kłębuszkowa prostaglandyn i tromboksanu w nefrotoksycznym nerczycowym zapaleniu nerek u szczurów. Wpływ na hemodynamikę nerek.”

Leczenie cyklofosfamidem rozszerza krążącą krwiotwórczą pulę komórek macierzystych u psów.

W krwi obwodowej człowieka po chemioterapii przeciwnowotworowej zaobserwowano zwiększoną liczbę krążących komórek prekursorowych granulocytów-monocytów (CFUc). Opracowaliśmy model psa do badania biologicznego znaczenia tego zjawiska do rekonstytucji krwiotwórczej po hematopoetycznie śmiertelnej ekspozycji na całkowite napromienienie ciała (TBI). Po podaniu cyklofosfamidu zaobserwowano 16-krotną ekspansję cyrkulujących liczb CFUc w okresie szybkiego odzyskiwania leukocytów, który wystąpił po nadiru wywołanym przez chemioterapię. Wcześniej wspominaliśmy o związku pomiędzy odzyskiwaniem leukocytów a rozszerzaniem CFUc w naszych badaniach na ludziach. Po 900 próbach rewizyjnych przeprowadzono rekonstytucję hematopoetyczną TBI z autologicznymi, kriokonserwowanymi kolekcjami jednojądrzastych komórek krwi obwodowej uzyskanych albo w czasie ekspansji post-cyklofosfamidowej CFUc (grupa A, 14 psów), albo bez ekspansji CFUc (grupa B, 12 psów). Continue reading „Leczenie cyklofosfamidem rozszerza krążącą krwiotwórczą pulę komórek macierzystych u psów.”

Przyleganie bakterii w patogenezie zapalenia wsierdzia. Interakcja bakteryjnego dekstranu, płytek krwi i fibryny.

Rola dekstranu w patogenezie bakteryjnego zapalenia wsierdzia badano badając przyleganie dekstranu produkującego doustne paciorkowce do składników pozakrzepowego zakrzepowego zapalenia wsierdzia (NBTE) in vitro i in vivo. Przyczepność Streptococcus sanguis do fibryny i płytek została określona w systemie testowym in vitro symulującym niebakteryjne zakrzepowe zapalenie wsierdzia. Przyrost był zwiększony, gdy organizmy hodowano w pożywce wzbogaconej w sacharozę (współczynnik przylegania X 10 (4), 177 +/- 6 w 5% sacharozie vs. 140 +/- 7 w 0,5% sacharozie, P mniej niż 0,001), i zmniejszone przez inkubację organizmów w dekstranazie (współczynnik przylegania X 10 (4), 117 +/- 16, P mniej niż 0,001), efekt, który został unieważniony przez inaktywację ciepła tego enzymu (stosunek przylegania X 10 (4), 192 + / – 7, P mniej niż 0,001). Ilość dekstranu wytworzonego w bulionie przez trzy różne paciorkowce doustne korelowała bezpośrednio z przyleganiem zaobserwowanym dla fibryny i macierzy fibrynowo-płytkowej in vitro (P poniżej 0,001). Continue reading „Przyleganie bakterii w patogenezie zapalenia wsierdzia. Interakcja bakteryjnego dekstranu, płytek krwi i fibryny.”