Utrata Smad3 w ostrej białaczce limfoblastycznej z limfocytów T cd

Związane z cykliną D3 kompleksy immunologiczne przemyto trzykrotnie 500 .l buforu RIPA i osad ponownie zawieszono w 30 .l buforu ładującego żel, a następnie ogrzewano w 95 ° C przez pięć minut w celu usunięcia związanych białek z kulek agarozowych. Kompleksy immunologiczne p27Kip1 traktowano w podobny sposób. Obie związane z cykliną D3 i wolne frakcje p27Kip1 rozdzielono za pomocą elektroforezy w żelu z dodecylosiarczanem sodu / poliakryloamidem na żelu TRIS-Glycine Novex (4 do 20 procent), przeniesiono na nitrocelulozę i inkubowano przez noc w 4 ° C z królicze przeciwciało poliklonalne przeciwko ludzkiemu p27Kip1 (sc-528, Santa Cruz Biotech) w rozcieńczeniu 1: 500 w soli fizjologicznej buforowanej TRIS zawierającej 4% mleka beztłuszczowego. Przeciwgrzybicze IgG osy skoniugowane z peroksydazą chrzanową (Amersham) stosowano do wykrywania związanego przeciwciała przeciw p27Kip1 za pomocą chemiluminescencji (system Pierce Super Signal West Pico). Analiza RNA Smad3 Messenger
RNA oczyszczono z próbek komórek białaczki i świeżo izolowanych prawidłowych komórek T krwi obwodowej przy użyciu odczynnika Trizol (Invitrogen) i wszelkie zanieczyszczające genomowe DNA usunięto przez trawienie DNazą RQ1 (Promega). Continue reading „Utrata Smad3 w ostrej białaczce limfoblastycznej z limfocytów T cd”

Wzorce ekspresji genów w opornych na leki komórkach ostrej białaczki limfoblastycznej i odpowiedź na leczenie cd

Tablice pominięto, jeśli współczynnik skalowania przekroczył 3 SD średniej lub jeśli stosunek 3 do 5 informacyjnego RNA dla dehydrogenazy .-aktyny lub dehydrogenazy gliceraldehyd-3 był większy niż 3. Z łącznej liczby 22 283 zestawów sond, te wyrażone w mniej niż pięciu pacjentach zostały pominięte, pozostawiając 14.550 zestawów sond do kolejnych analiz. Dla każdego czynnika antybakteryjnego zidentyfikowaliśmy geny najbardziej dyskryminujące pod względem odporności i czułości, stosując test sumy rang Wilcoxona i test t dla każdego zestawu sond i oszacowano współczynnik fałszywego wykrywania przy użyciu wartości q zgodnie z Storey i Tibshirani. wybraną wartość P (alfa) dla ocenianych genów dyskryminujących (np. P <0,001), ogólne znaczenie szacowanego odsetka fałszywych odkryć obliczono jako prawdopodobieństwo zaobserwowania równych lub niższych wyników fałszywych odkryć na podstawie 1000 losowych permutacji. Continue reading „Wzorce ekspresji genów w opornych na leki komórkach ostrej białaczki limfoblastycznej i odpowiedź na leczenie cd”

Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad

Aktywacja C / EBP. i C / EBP., które są antyproliferacyjnymi czynnikami transkrypcyjnymi, prowadzi do różnicowania komórek.14-17 W przeciwieństwie do C / EBP. i C / EBP. wydaje się napędzać progresję cyklu komórkowego.16-19 form C / EBP. kompleksy z C / EBP. Continue reading „Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad”

Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 9

Jednak, aby zwizualizować te mniejsze prążki białek, musieliśmy podwoić czas ekspozycji immunoblotów. Aby określić, czy brak C / EBP. jest cechą patofizjologiczną obecną w komórkach innych niż komórki mięśni gładkich oskrzeli, wyizolowaliśmy limfocyty krwi obwodowej od czterech osób z astmą i czterech bez astmy. Wykryliśmy białko C / EBP. we wszystkich próbkach (Figura 4B). Continue reading „Dysfunkcyjne oddziaływanie C / EBP i receptora glukokortykoidów w komórkach mięśni gładkich oskrzeli ad 9”

Jednokierunkowy transfer endonadtlenków prostaglandyn między płytkami krwi i komórkami śródbłonka.

Ważną determinantą interakcji ściany płytkowej z płytką jest lokalna równowaga produkcji śródbłonkowej prostacykliny (PGI2) i tromboksanu płytkowego (TX) A2, labilnych eikozanoidów z przeciwstawnym wpływem na hemostazę. Sporne dowody sugerują, że pochodzące z płytek półprodukty oksoperoksytankowe prostaglandyn mogą być wykorzystywane jako substraty do syntezy naczyniowych PGI2. Stosując kilka różnych podejść, stwierdziliśmy, że płytki mogą przenosić endonadtlenki do hodowanych komórek śródbłonka w celu wydajnej konwersji do PGI2, ale wzajemny transfer endonadtlenków śródbłonka do wykorzystania przez płytkową syntetazę tromboksanu nie występuje w tych samych warunkach eksperymentalnych. Jednakże, płytki krwi mogą wykorzystywać kwas arachidonowy uwalniany przez komórki śródbłonka do metabolizmu lipooksygenazy. Bezpośrednio wykazaliśmy wytwarzanie [3H] 6-keto-PGF1 alfa (produkt rozpadu [3H] PGI2) przez komórki śródbłonka traktowane aspiryną w obecności płytek stymulowanych kwasem [3H] arachidonowym. Continue reading „Jednokierunkowy transfer endonadtlenków prostaglandyn między płytkami krwi i komórkami śródbłonka.”

Wpływ hormonu przytarczycznego i mocznicy na prędkość przepływu nerwów obwodowych i szybkość przewodzenia nerwów ruchowych

Neuropatia obwodowa nie jest rzadkim powikłaniem przewlekłej mocznicy. Ponieważ hormon przytarczyczny, zwiększając stężenie wapnia w mózgu, jest częściowo odpowiedzialny za aberracje ośrodkowego układu nerwowego w mocznicy, badaliśmy względną rolę mocznicy jako takiej i (lub) hormonu przytarczyc na wapń nerwów obwodowych i prędkość przewodzenia nerwów ruchowych (MNCV). Badania przeprowadzono w sześciu grupach po sześć psów każda, w następujący sposób: (a) normalne psy, (b) zwierzęta leczone tyrolitycznie tarczycy (T-PTX), (c) psy z 3 dniami mocznicy wytwarzane przez obustronną nefrektomię, (d) PTX przed indukcją ostrej niewydolności nerek, (e) normalne psy otrzymujące 100 j / dzień przytarczyc (PTE) przez 3 dni i (f) normalne zwierzęta otrzymujące 3 dni PTE, a następnie 5 dni bez PTE. Zawartość wapnia w nerwie obwodowym (wyrażona w miligramach na kilogram suchej masy) wynosiła 252. 5 (SE) u zdrowych zwierząt i 262. Continue reading „Wpływ hormonu przytarczycznego i mocznicy na prędkość przepływu nerwów obwodowych i szybkość przewodzenia nerwów ruchowych”

Maksymalne natężenie przepływu wydechowego w wywołanym skurczem oskrzeli u człowieka

Oceniliśmy zmiany krzywych maksymalnego przepływu wydechowego (MEFV) i krzywych przepływu częściowego wydechu (PEFV) wywołanych lekami zwężającymi oskrzela i pyłem i porównaliśmy je z odwrotnymi zmianami wywołanymi lekiem rozszerzającym oskrzela u wcześniej skurczów oskrzeli. Pomiary maksymalnego przepływu przy stałym wydatku płuc (tj. Litrach objętości klatki piersiowej) wykazały większe zmiany, zarówno po zwężeniu, jak i po rozszerzeniu, niż pomiary szczytowego natężenia przepływu wydechowego, s wymuszonej objętości wydechowej i nachylenia niezależnej od wysiłku części MEFV Krzywe. Zmiany przepływów na krzywych PEFV (wykonanych po wdechu do średniej pojemności życiowej) były zwykle większe niż przepływów na krzywych MEFV (wykonanych po inspiracji do całkowitej pojemności płuc). Zmniejszone maksymalne prędkości przepływu po dusicielach nie są spowodowane zmianami statycznej siły odrzutu płuc i przypisywane są zwężeniu małych dróg oddechowych, tj. Continue reading „Maksymalne natężenie przepływu wydechowego w wywołanym skurczem oskrzeli u człowieka”

Ostre zmiany w powinowactwie oksyhemoglobiny EFEKTY TRANSPORTU I WYKORZYSTANIA TLENU

Postulowano, że zależne od 2,3-difosfoglicerynianu (DPG) zmiany w powinowactwie oksyhemoglobiny odgrywają ważną rolę w dostarczaniu tlenu; nie oceniono jednak systematycznie wpływu ostrego zwiększenia powinowactwa bez zmiany masy czerwonych krwinek. Badanie to miało na celu pomiar zmian w transporcie tlenu i zużyciu tlenu, wywołanych przez nagły wzrost powinowactwa oksyhemoglobiny, spowodowany autologiczną transfuzją wymiany krwi z użyciem krwi z niedoborem DPG. Z każdej z 10 5-kilogramowych małp rezus pobrano 100 ml krwi w 1. i 3. tygodniu badania, z których każde przechowywano w 25 ml roztworu do przechowywania kwas cytrynian-dekstroza. Continue reading „Ostre zmiany w powinowactwie oksyhemoglobiny EFEKTY TRANSPORTU I WYKORZYSTANIA TLENU”

Lokalizacja angiotensyny II i jej podtypu receptora podtypu w ludzkim endometrium oraz identyfikacja nowego miejsca wiązania angiotensyny o wysokim powinowactwie II.

Angiotensyna (ANG) II jest nie tylko silnym czynnikiem zwężającym naczynia, ale może również brać udział w regeneracji nowych naczyń krwionośnych. W proliferacyjnym endometrium wykryto immunoreaktywność podobną do ANG II w nabłonku gruczołowym i zrębie z nieznacznym wybarwianiem wokół śródbłonka naczyniowego. Przeciwnie, w endometrium wydzielniczym stwierdzono intensywne barwienie immunologiczne w okołonaczyniowych komórkach zrębowych wokół tętnic spiralnych endometrium z pomijalnym wybarwianiem innych typów komórek. Ilościowa autoradiografia receptora z użyciem nieselektywnego radioliganda [125I] -ANG II i selektywnych konkurencyjnych związków podtypu wykazała, że endometrium zawiera głównie receptory AT2, ze stosunkowo niską ekspresją receptorów AT1 i nowe miejsce rozpoznawania nie-AT1 / nie-AT2 angiotensyny II, które było niewrażliwe do selektywnych ligandów AT1 lub AT2. Poziomy specyficznego wiązania receptora [125I] -ANG II wykazywały cykliczne zmiany podczas cyklu menstruacyjnego, osiągając maksimum we wczesnym wydzielniczym błędzie śluzowym macicy, a następnie zmniejszając się w środkowym i późnym wydzielniczym błonie śluzowej macicy do poziomów obserwowanych we wczesnym i środkowym proliferacyjnym endometrium. Continue reading „Lokalizacja angiotensyny II i jej podtypu receptora podtypu w ludzkim endometrium oraz identyfikacja nowego miejsca wiązania angiotensyny o wysokim powinowactwie II.”