Transport kwasów alfa-aminoizomasłowych w ludzkich limfocytach białaczkowych: charakterystyka in vitro i hamowanie kortyzolem i cykloheksymidem

Badaliśmy transport kwasu alfa-aminoizomasłowego (AIB) -3-14C i jego odpowiedź na kortyzol i cykloheksimid in vitro w limfocytach krwi od nieleczonych pacjentów z przewlekłą białaczką limfocytową. Nagromadzenie AIB-3-14C wzrastało liniowo przez 60 min i osiągnęło pozorny stan ustalony po 120 minutach. Początkowa szybkość akumulacji AIB (Vo) wahała się od 1,1 do 10,2. Moli / kg H2O komórki na minutę w komórkach od 16 różnych pacjentów; jednak Vo był powtarzalny w komórkach od pięciu z sześciu pacjentów, które były badane wielokrotnie w ciągu 1-9 miesięcy, i dodatnio korelował z liczbą limfocytów (r = 0,51, P = <0,01). Stwierdzono, że praktycznie całkowite zahamowanie syntezy białka cykloheksimidem zmniejsza akumulację AIB w komórkach od czterech pacjentów, którzy mieli wysoki wskaźnik transportu AIB, ale nie mieli wpływu na transport w komórkach od czterech pacjentów, którzy akumulowali AIB wolniej. Wyniki te wskazują, że transport aktywny zależy częściowo od obecności białka labilnego o szybkości obrotu, która jest różna w różnych populacjach komórkowych. Traktowanie 10 (3M kortyzolem przez 240 minut in vitro zmniejszyło początkową szybkość akumulacji AIB-3-14C (Vo) o 43,4 . 4,1% (SE) (zakres, 9-66%) w komórkach od 16 pacjentów. Stopień zahamowania nie różnił się znacząco w okresie 9 miesięcy u czterech z pięciu pacjentów. Wpływ kortyzolu był proporcjonalny do początkowego stężenia i rozwijał się w niskich stężeniach (0,1-1,0. M). Wydaje się, że kortyzol zmniejsza akumulację AIB, hamując pobór czynny, ponieważ ani nie poprawiał exodusu AIB, ani nie hamował najwyraźniej transportu nienasyconego. Hamowanie było niekonkurencyjne, co sugeruje, że kortyzol zmniejsza całkowitą pojemność aktywnego mechanizmu transportu. Kortyzol hamował transport AIB pośrednio przez proces, który wymagał syntezy białka de novo, ponieważ hamowanie (a) pojawiło się dopiero po 60 minutach leczenia, (b) było obecne w traktowanych komórkach, które następnie inkubowano przez 60 min w podłożu wolnym od kortyzolu, i (c) nie rozwinęły się podczas jednoczesnej blokady syntezy białka cykloheksymidem, nawet gdy sam cykloheksymid nie zmniejszył transportu AIB.
[hasła pokrewne: remifemin opinie, androvit cena, teczowa kraina ]