Utrata Smad3 w ostrej białaczce limfoblastycznej z limfocytów T ad 7

Wygląd jednego lub więcej przegrupowanych fragmentów, różniących się od konfiguracji linii zarodkowej (wskazanej przez strzałkę na ścieżce 1), sugeruje proces klonalny, podobny do obserwowanego w białaczkowych limfoblastach u myszy transgenicznych SCL-LMO1 (ścieżki 4 i 5). 9 Smad 3-dodatnich (brązowych) białaczkowych jest widocznych w guzie grasicy (Panel J) i infiltrującym mięśniu sercowym (Panel K). Analiza Western blot pokazuje ekspresję Smad3 w grasicy i śledzionie dotkniętych myszy p27Kip1 – / -, Smad3 +/- (Panel L). Ekspresję Smad3 przez limfoblasty udokumentowano w narządach limfoidalnych (ścieżki 4 i 7), a w komórkach białaczkowych oczyszczono metodą oddzielania kulek magnetycznych od miąższu naciekającego płuca i wątroby (ścieżki i 2, odpowiednio). Swoistość przeciwciała Smad3 jest wskazywana przez pasmo wykryte w komórkach Mv1Lu reagujących na TGF-. (ścieżka 8), ale nieobecna w śledzionie i grasicy myszy Smad3 – / – (ścieżki 5 i 6, odpowiednio). Następnie opracowaliśmy model myszy, w którym utracono jeden allel Smad3 w połączeniu z homozygotyczną delecją p27Kip1 przez krzyżowanie samic myszy Smad3 +/- z samcami myszy p27Kip1 – / –.8 Chociaż myszy p27Kip1 – / – mają zwiększoną liczbę normalne limfocyty T i zwiększona komórkowość narządów limfatycznych, białaczka nie rozwija się u takich myszy.8 Tylko 50 procent myszy p27Kip1 – / -, Smad3 +/- żyło ponad sześć miesięcy (Figura 4A). Histologiczna ocena tych myszy wykazała nacieki limfocytarne w wielu narządach, przerost limfoidalny, nefropatię i kardiomiopatię. Białaczka T-komórkowa rozwinęła się w 10 procentach (5 z 50) myszy p27Kip1 – / -, Smad3 +/- (Figura 4). Choroba charakteryzowała się rozlaną limfadenopatią i powiększeniem śledziony (Figura 4B i Figura 4C), masywnym powiększeniem grasicy (Figura 4D) i limfoblastami (Figura 4E) w wielu narządach (Figura 4F i Figura 4G). Immunofenotyp komórek T mysich białaczek wykazano za pomocą analizy cytometrycznej (Figura 4H), a analiza Southern blot łańcucha . receptora komórek T wykazała, że guzy te były klonalne (Figura 4I). Smad3 był wyrażany z zatrzymanego allelu, o czym świadczy wykrycie Smad3 w nowotworach grasicy (Figura 4J) i infiltrowane narządy (Figura 4K) przez immunohistochemię i lizaty oczyszczonych limfoblastów metodą Western blot (Figura 4L). Nie mogliśmy ocenić wpływu homozygotycznej delecji Smad3 u myszy p27Kip1 – / -, ponieważ w czasie embriogenezy u myszy z tym genotypem wystąpił znaczny spadek śmiertelności.
Dyskusja
Znaleźliśmy bezpośrednie dowody funkcji supresorowej guza dla Smad3 w linii komórek T. Chociaż stwierdzono mutacje w genach kodujących Smad2 (MADH2) lub Smad4 (MADH4) w ludzkich nowotworach, 2 według naszej wiedzy, nie odnotowano dezaktywacji mutacji w genie Smad3 (MADH3). Nie udało się również znaleźć mutacji w MADH3 u naszych pacjentów z ALL T-cell. Nasze wyniki pokazują, że względna redukcja poziomu Smad3 może upośledzać funkcję supresora guza w szlaku TGF-.. Do tej pory nie byliśmy w stanie określić mechanizmu odpowiedzialnego za utratę ekspresji białka Smad3.
Nasza analiza myszy p27Kip1 – / -, Smad3 +/- wyraźnie wskazuje, że Smad3 może pracować w tandemie z utratą p27Kip1 w celu promowania leukemogenezy komórek T Znaczenie aktywności supresorowej guza p27Kip1 u ludzi sugeruje związek obniżonych poziomów p27Kip1 w nowotworach ze złym rokowaniem10. Hamujący wpływ p27Kip1 na progresję cyklu komórkowego jest również znoszony przez wiele mechanizmów w nowotworach limfoidalnych.11 Mutacje punktowe i homozygotyczne delecje CDKN1B (genu kodującego p27Kip1) stwierdzono w dorosłej białaczce z limfocytów T12. W pediatrycznej ALL, hemizygotyczna delecja CDKN1B została opisana jako główna konsekwencja delecji 12p chromosomów.7 Chociaż wytwarzanie p27Kip1 wiąże się z zatrzymaniem cyklu komórkowego w G1 w odpowiedzi na TGF-., p27Kip1 nie jest bezwzględnie wymagany do zatrzymania cyklu komórkowego, ponieważ pierwotne komórki T myszy p27Kip1 – / – są hamowane przez TGF-..
Podsumowując, nasze dane pokazują, że poziom Smad3 jest wyznacznikiem odpowiedzi komórek T na TGF-. i że zmniejszenie Smad3 może działać w tandemie z wystąpieniami onkogennymi, takimi jak zmiany w szlaku siatkówczaka, w celu promowania T- białaczka komórek. Co najważniejsze, dane te identyfikują odrębną rolę Smad3 w pośredniczeniu w sygnalizacji TGF-. w aktywacji i leukemogenezie limfocytów T.
[przypisy: anastrozol, ambrisentan, dronedaron ]
[więcej w: flucofast opinie, goodlookin allegro, hydrocortisonum cena ]